重组蛋氨酸裂解酶原核体系的表达及纯化

• 作者: 任晓丽 张芳 田腊梅 田长富 胡振良
• 来源期刊: 昆明医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组 蛋氨酸裂解酶 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 专家论坛
• 页码范围: 3-7
• 分类号: Q812
• 字数: 3810字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-4706.2012.06.002

摘要

目的 建立L-蛋氨酸γ-裂解酶的原核表达、纯化体系.方法 合成Metase基因并构建重组质粒pBSK-Metase.通过分子克隆技术,构建重组表达质粒pBV220-Metase和pGEX-4T-1-Metase,并将重组子转化到感受态大肠杆菌Dh5α中.pGEX-4T-1-Metase经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导;pBV220-Metase经42℃温度诱导;并对诱导条件进行优化,获得大量表达;建立蛋氨酸裂解酶纯化体系.结果 构建出Metase基因的两种高效原核表达体系pBV220-Metase和pGEX-4T-1-Metase,并优化各自的最佳诱导表达条件;建立重组蛋氨酸裂解酶的纯化体系.结论 成功建立重组蛋氨酸裂解酶的原核表达、纯化体系;获得高效原核表达重组子pGEX-4T-1-Metase,且获得纯度高达95%的蛋氨酸酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田长富	昆明医科大学生物医学工程研究中心基因与蛋白质工程研究室	8	12	2.0	3.0
2	胡振良	昆明医科大学生物医学工程研究中心基因与蛋白质工程研究室	2	2	1.0	1.0
3	张芳	昆明医科大学生物医学工程研究中心基因与蛋白质工程研究室	1	1	1.0	1.0
4	田腊梅	昆明医科大学生物医学工程研究中心基因与蛋白质工程研究室	2	2	1.0	1.0
5	任晓丽	昆明医科大学生物医学工程研究中心基因与蛋白质工程研究室	2	1	1.0	1.0