狂犬病病毒糖蛋白真核表达质粒的构建及免疫原性的初步研究

• 作者: 刘景华 曹守春 李加 李玉华 王云鹏 石磊泰 董关木
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 狂犬病病毒 糖蛋白 免疫原性
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 1017-1019
• 页数: 3页
• 字数: 2737字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2012.12.005

摘要

目的 构建狂犬病病毒糖蛋白基因DNA真核表达质粒,并检测其免疫原性.方法 用RT-PCR法扩增和分离CTN株狂犬病病毒糖蛋白基因,测序后克隆至pcDNA5.0载体,构建重组质粒pcDNA5.0-G,提取质粒,转化293T细胞,检测糖蛋白瞬时表达,并以该重组质粒肌肉注射免疫BALB/c小鼠,狂犬病病毒CVS株攻击,观察小鼠存活情况.结果 酶切、测序结果显示重组质粒pcDNA5.0-G构建成功,瞬时表达结果显示糖蛋白获得大量表达.经肌肉注射质粒常规免疫小鼠,病毒攻击后小鼠保护率为73.3％,对照组为6.7％.结论 所构建狂犬病病毒糖蛋白真核表达质粒pcDNA5.0-G经肌肉注射免疫后可有效保护小鼠免受狂犬病病毒攻击,具有良好的免疫原性,这为后期核酸疫苗的研发奠定基础.