Lrrcl0蛋白表达载体的构建

• 作者: 李晓霞 陈祥贵
• 来源期刊: 四川理工学院学报：自然科学版
• 学科: 生物学
• 关键词: LrrclO 重组质粒 基因表达 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 化学、生物及材料科学
• 页码范围: 19-21
• 分类号: Q786
• 字数: 1086字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1549.2012.01.005

摘要

为了构建重组质粒pET～Lrrcl0和Lrrcl0蛋白表达，利用NcoI和BamHI双酶切载体pMDl8-T-Lrrcl0，回收目的片段与经同样酶切后的表达载体pET-30a（＋），转入E．colistrainDH5d．茵落PCR筛选阳性茵落，提取阳性茵质粒并进行PCR和酶切鉴定；将重组子转入E．colistrainB121（DE3），于37℃振荡培养，用1mmol／LIPTG诱导目的蛋白的表达。结果表明，成功构建了融合表达载体并命名为pET-Lrrcl0。转入E．colistrainBL21（DE3）进行目的蛋白的表达，获得与预期分子量大小相一致的融合表达蛋白Lrrcl0；Lrrcl0蛋白以包涵体形式存在于宿主菌中，且IPTG诱导4小时，目的蛋白表达量最大。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈祥贵	西华大学生物工程学院	80	467	14.0	18.0