猪日本脑炎病毒NS3蛋白的基因克隆、原核表达及纯化

• 作者: 余风艳 张保新 沈红霞 王晓杜 赵凡凡 韩秀杰
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 日本脑炎病毒 NS3 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 5-8
• 分类号: S852.659.6|Q785
• 字数: 3319字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2012.02.002

摘要

提取猪日本脑炎病毒(JEV)上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,RT-PCR扩增JEV的NS3基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28(a)上,酶切鉴定和PCR鉴定重组原核表达质粒pET-28(a)-JEV-NS3,转化大肠埃希菌BL21( DE3)菌株,IPTG诱导表达重组His-JEV-NS3蛋白,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达,his-band试剂盒纯化重组蛋白.获得了1.8 kb NS3基因片段,成功构建重组原核表达质粒pET-28(a)-JEV-NS3.IPTG诱导获得分子质量为64 ku的His-JEV-NS3蛋白,该蛋白主要以包涵体形式表达,表达量占总菌体蛋白的30％以上,纯化后获得高纯度重组蛋白,其占总蛋白比例达70％以上.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晓杜	浙江农林大学动物科技学院	20	68	4.0	7.0
2	沈红霞	浙江农林大学动物科技学院	3	5	1.0	2.0
3	韩秀杰	浙江农林大学动物科技学院	4	8	2.0	2.0
4	赵凡凡	浙江农林大学动物科技学院	6	16	3.0	3.0
5	张保新	浙江农林大学动物科技学院	4	9	2.0	2.0
6	余风艳	浙江农林大学动物科技学院	3	5	1.0	2.0