HIF-1α基因慢病毒载体的构建和鉴定

• 作者: 付珊 余勤 刘伟 单威 周丽萍 朱振洪 王标 胡韶君
• 来源期刊: 浙江中医药大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: HIF-1α 慢病毒载体 293T细胞
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 中药研究
• 页码范围: 1221-1224
• 页数: 4页
• 分类号: R331
• 字数: 3361字
• 语种: 中文

摘要

[目的]构建带有大鼠HIF-1α基因的慢病毒表达载体,并进行病毒颗粒的包装与对293T的转染.[方法]从pEGFP-N1-HIF-1α载体中扩增出HIF-1α基因片段,将目的基因与pLenti6.3-MCS-RES2-EGFP载体连接,获得慢病毒表达载体pLenti6.3-HIF-1 α-IRES2-EGFP,并用磷酸钙转染法将其与慢病毒包装系统共同转染到293T细胞内进行病毒包装,48h后收集上清液并过滤,按不同感染复数感染293T细胞,通过观察报告基因绿色荧光蛋白的表达来测定病毒滴度和感染效率.[结果]构建了共表达HIF-1α基因和EGFP基因的重组慢病毒载体pLenti6.3-HIF-1 α-IRES2-EGFP,经PCR及测序结果证实,并对其成功包装出慢病毒,病毒滴度为4×106TU/ml.[结论]成功构建出HIF-1α基因重组慢病毒载体pLenti6.3-HIF-1 α-IRES2-EGFP并能有效的包装出慢病毒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余勤	浙江中医药大学生物工程学院	108	501	11.0	18.0
2	朱振洪	浙江中医药大学生物工程学院	49	168	7.0	11.0
3	周丽萍	浙江中医药大学生物工程学院	22	36	4.0	5.0
4	付珊		3	24	2.0	3.0
5	王标	浙江中医药大学生物工程学院	7	9	2.0	3.0
6	单威	浙江中医药大学生物工程学院	6	9	2.0	3.0
7	刘伟	浙江中医药大学生物工程学院	7	13	3.0	3.0
8	胡韶君	浙江中医药大学生物工程学院	5	15	3.0	3.0