益生菌制品中植物乳杆菌ST-Ⅲ快速定性、定量检测方法的建立

• 作者: 任婧 刘振民 艾连中 陈臣
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 益生菌 植物乳杆菌ST-Ⅲ PCR Real-time PCR 定性定量检测
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子生物学
• 页码范围: 1443-1446
• 页数: 4页
• 分类号: TS252.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2012.10.1443

摘要

[目的]建立快速定性、定量检测益生菌产品中植物乳杆菌菌株ST-Ⅲ的方法,为其实际应用提供参考.[方法]根据植物乳杆菌菌株ST-Ⅲ与NCBI库中3株已知序列的植物乳杆菌全基因组序列差异,设计菌株特异性引物,进行菌株特异性PCR验证和定性检测;然后建立荧光定量PCR,并检测益生菌制品中菌株ST-Ⅲ含量.[结果]设计的引物具有良好的菌株特异性;经PCR扩增,含有ST-Ⅲ的检验样本出现预期特征条带,与预期目的片段(242 bp)相近.建立的荧光定量PCR标准曲线方程为y=-3.3691gx+39.84,R2为0.9990,符合Real-time PCR定量的要求,其检测限为2.85×l03CFU/mL.经检测,样品中植物乳杆菌ST-Ⅲ的数量分别为3.25×105、1.28×106、4.55X106 CFU/mL.[结论]建立的植物乳杆菌菌株ST-Ⅲ定性、定量检测方法快速灵敏、测定时间短,可以在实际生产中应用.