猪瘟病毒多表位基因的表达及其免疫原性分析

• 作者: 侯相民 刘湘涛 吴锦艳 尚佑军 田宏 陈妍
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 复合多表位抗原基因 融合表达 活性分析
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 270-274
• 分类号: S852.651
• 字数: 3987字
• 语种: 中文

摘要

体外表达猪瘟病毒(CFSV)T、B细胞表位,并对表达产物的免疫原性进行分析.人工合成CFSV的多个T、B细胞表位及表位之间的连接linker基因,并将该基因插入pGEX-6P-1表达载体,经酶切和测序鉴定获得重组阳性克隆,成功构建了CFSV复合多表位抗原基因的原核表达质粒pGEX-BT500,转化E.coli BL21,IPTG诱导表达,纯化表达产物并免疫兔.结果:通过IPTG诱导目的基因可高效表达,SDS-PAGE结果表明,以终浓度为0.9 mmol· L-1的IPTG进行诱导,7h后表达量最高,产物分泌表达,相对分子质量约43 ku,表达产量约占菌体总蛋白的30％.Western blotting检测表明,表达的融合蛋白能与猪瘟阳性血清发生特异性反应；兔攻毒试验表明所免疫表达产物可保护(根据发热反应评价)兔.结果表明表达获得的产物具有良好的反应原性,这为应用该融合蛋白制备CSFV免疫血清学诊断试剂和多表位疫苗研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尚佑军	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	37	117	6.0	10.0
2	田宏	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	12	60	4.0	7.0
3	陈妍	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	10	11	2.0	3.0
4	吴锦艳	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	15	46	2.0	6.0
5	侯相民	中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室	3	2	1.0	1.0