乳铁蛋白抗菌-免疫调节融合肽的载体构建及在大肠杆菌中的表达和纯化

• 作者: 任明强 何晓光 张文晓 秦宜德 郑欣
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 乳铁蛋白抗菌肽 免疫调节肽 融合蛋白 纯化 亲和层析
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 641-644
• 分类号: R341|R394.2
• 字数: 2446字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2012.06.007

摘要

目的 构建乳铁蛋白抗菌-免疫调节融合肽(LIFP)表达载体,在E.coli BL21中诱导高表达并进行纯化.方法 以乳铁蛋白抗菌肽(LfcinB)与乳源免疫调节肽(PGPIPN)的序列为参照,以连接臂(GGGGS)连接两种肽,设计LIFP基因,并在其5′端设计凝血酶FXa识别的酶切位点.将融合肽基因构建到表达载体pGEX-KG中,转化到E.coli BL21中,用IPTG低温诱导表达,通过AKTA层析系统纯化融合蛋白,Western blot进行鉴定.结果 成功构建pGEX-KG-LIFP原核表达载体,并诱导其高表达.通过AKTA蛋白纯化系统,用亲和层析方法纯化,得到高纯度的融合蛋白.结论 成功构建了LIFP表达载体,制备并纯化了LIFP,为进一步研究该肽功能和药物开发奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦宜德	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	70	493	11.0	19.0
2	张文晓	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	4	23	3.0	4.0
3	郑欣	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	4	32	4.0	4.0
4	何晓光	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	4	32	4.0	4.0
5	任明强	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	1	4	1.0	1.0