乳源抗菌-免疫调节融合蛋白原核表达和纯化

• 作者: 刘滋康 周艳 江良梁 王超 秦宜德
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠杆菌 肽类/遗传学 基因表达 重组融合蛋白质类
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 260-263
• 页数: 4页
• 分类号: R341.6|R378.2|R394.3|R978.16
• 字数: 3224字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2008.03.006

摘要

目的 构建乳铁蛋白抗菌肽(Lfcin B)与免疫调节肽(PGPIPN)融合肽表达质粒,并在大肠杆菌BL21中表达及纯化.方法 采用重叠延伸PCR技术获得融合肽基因片段,并构建到原核表达载体pGEX-KG中,挑选阳性重组子,经限制性内切酶鉴定后转化到大肠杆菌BL21,然后用IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE及Western-blot方法鉴定表达的融合蛋白.用Glutathione Sepharose 4B亲和层析方法纯化融合蛋白.结果 成功构建原核表达质粒pGEX-KG-FP,并在大肠杆菌BL21中诱导其高表达.SDS-PAGE及Western-blot分析显示,特异性的抗GST单克隆抗体所识别的融合蛋白分子量与理论值相近.经Glutathione Sepharose 4B纯化后,得到较纯的GST-FP融合蛋白.结论 构建了原核表达的融合蛋白质粒,并高效表达和纯化了该融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦宜德	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	70	493	11.0	19.0
2	周艳	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	19	87	6.0	9.0
3	王超	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	37	174	8.0	12.0
4	江良梁	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	4	5	2.0	2.0
5	刘滋康	安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室	4	19	3.0	4.0