温州蜜柑萎缩病毒小外壳蛋白基因克隆与原核表达及其抗体制备

• 作者: 孙现超 李婷婷 武改霞 青玲
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 柑橘 温州蜜柑萎缩病毒 小外壳蛋白 原核表达 抗体
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 果树
• 页码范围: 64-72
• 分类号: S666|S436.629
• 语种: 中文

摘要

用RT-PCR方法，从采自重庆奉节的‘宫本’柑橘的2个样品中扩增出温州蜜柑萎缩病毒（Satsumaawarfvirus，SDV）SDVRNA2的3r末端，长度为975bp，与报道的SDVS-583’末端序列同源性分别为98．7％和98．4％。根据获得的序列设计引物，以含有SDVFJ3’末端序列的质粒为模板，PCR扩增获得大小为654bp的SDV-FJd,#l-壳蛋白（Smallcoatprotein，CPS）基因产物。构建了CPS与GST融合表达载体PGEX．CPS，在37℃、1．0mmol·L。IPTG条件下诱导表达，SDS．PAGE电泳分析表明成功表达出分子量约为42kD的GST-CP融合蛋白。以表达的融合蛋白为抗原免疫家兔，制备的抗血清的效价为1／12800。用获得的抗体进行组织印迹分析表明，SDV在柑橘叶柄基部韧皮部维管束区域含量最高。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李婷婷	西南大学植物保护学院植物病害生物学重庆市高校级重点实验室	40	200	7.0	12.0
2	青玲	西南大学植物保护学院植物病害生物学重庆市高校级重点实验室	47	293	9.0	12.0
3	武改霞	西南大学植物保护学院植物病害生物学重庆市高校级重点实验室	2	4	1.0	2.0