重组HEV衣壳蛋白截短体的表达及鉴定

• 作者: 刘立明 季慧范 屈勇刚 李霄 贾鹏 赫东芸 迟宝荣 金宁一
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: 戊型肝炎病毒 衣壳蛋白 病毒样颗粒 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 生物化学
• 页码范围: 2481-2485
• 页数: 5页
• 分类号: O629|Q51|R373.2+1
• 字数: 2310字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7503/cjcu20120368

摘要

戊型肝炎(HE)是由戊型肝炎病毒(HEV)感染引起的白道病毒性传染病.HEV是一种无囊膜的单股正链RNA病毒,其编码区由3个开放阅读框(ORF)组成,属戊型肝炎病毒科.HEV衣壳蛋白由ORF2编码.本研究根据编码HEV ORF2aa382～aa674的核苷酸序列克隆了p293基因,并将其克隆入原核表达载体pET28a,利用大肠杆菌BL21(DE3)对HEV衣壳蛋白截短体(p293)进行了表达.SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,在优化的表达条件下(1 mmoL/L IPTG,250 r/min,37℃,5h),重组蛋白p293能够在大肠杆菌内有效表达,目的蛋白约占总蛋白的66.15％.TEM检测结果显示,原核表达的p293能够在体外形成约30 ～40 nm的病毒样颗粒.免疫印迹和免疫荧光检测结果表明,p293与HEV标准阳性血清具有良好的反应原性和反应特异性.实验结果表明,p293可应用于HEV宿主吸附和病毒装配研究,为HEV的预防与诊断研究奠定了基础.