小鼠EVL基因的克隆和真核表达载体的构建

• 作者: 徐骁 曹秀丽 邹海 韩骅 高方
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: EVL蛋白 基因克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2012,（24）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 4606-4610
• 分类号: Q95-3|Q75|Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:构建小鼠EVL(Ena/VASP like)基因的真核表达载体,为深入研究EVL的功能奠定基础.方法:采用PCR方法,从小鼠cDNA文库中,扩增出1245bp的EVL编码区片段,经电泳、胶回收后连接入pMD- 18T载体中,测序鉴定正确.用BamHI和HincⅡ双酶切,定向克隆EVL编码区片段到真核表达载体pcDNA3.1中,用限制性内切酶酶切鉴定重组质粒正确后.将重组质粒转染入HELA细胞中,以RT-PCR检测EVL的mRNA的表达,以Western Blot检测EVL蛋白的表达.结果:酶切鉴定结果显示小鼠EVL编码区基因被成功克隆入真核表达载体pcDNA3.1中；RT-PCR和Western Blot结果以及免疫荧光染色显示Hela细胞中有EVL的mRNA和蛋白的表达.结论:成功获得pcDNA3.1 -EVL的真核表达载体,为进一步深入研究EVL蛋白的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩骅	第四军医大学基础部医学遗传学与发育生物学教研室	118	472	11.0	13.0
2	曹秀丽	第四军医大学基础部神经生物学教研室	3	6	1.0	2.0
3	高方	第四军医大学基础部神经生物学教研室	2	1	1.0	1.0
4	邹海	第四军医大学基础部医学遗传学与发育生物学教研室	3	4	1.0	2.0
5	徐骁	第四军医大学基础部神经生物学教研室	1	0	0.0	0.0