普鲁兰短梗霉N2-3菌株碱性蛋白酶的纯化及性质研究

• 作者: 尼秀媚 李红 王惠 白桦
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 蛋白酶 纯化 性质
• 年，卷（期）: 2012,（32）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 15588-15592,15596
• 页数: 6页
• 分类号: S188
• 字数: 5522字
• 语种: 中文

摘要

[目的]对普鲁兰短梗霉N2-3菌株的碱性蛋白酶进行纯化,并对其性质进行研究.[方法]利用层析柱Sephadex G-75与阴离子交换柱DEAE Sepharose Fast Flow纯化菌株N2-3的胞外碱性蛋白酶,并对纯化的酶进行SDS-PAGE凝胶电泳检测,同时对纯化蛋白酶的最适反应温度、温度稳定性、最适反应pH、pH稳定性进行测定,研究金属离子及各种化合物对蛋白酶活性的影响.[结果]试验中N2-3菌株的碱性蛋白酶纯化倍数和回收率分别为2.34和25.9％；SDS-PAGE凝胶电泳显示该酶的分子量约为33 kDa；该酶的最适反应温度和pH分别为52℃和9.0；Mn2+、Mg2+、Na+离子浓度在5 mmol/L时对纯化蛋白酶的酶活有激活作用,Zn2+、Ca2+、K+、Li+对酶活的影响不大,而当存在Fe2+、Fe3+、Cu2+、Co2+、Ag+、Hg2+离子时,蛋白酶活明显降低；苯甲基硫酰氟(PMSF)强烈抑制了该蛋白酶的活性,而乙二胺四乙酸(EDTA)与碘乙酸微弱抑制了该蛋白酶的活性.[结论]为普鲁兰短梗霉N2-3菌株碱性蛋白酶的工业化生产提供了一定的理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尼秀媚		16	51	5.0	6.0
2	王惠		7	10	2.0	3.0
3	白桦		4	15	2.0	3.0
4	李红		2	2	1.0	1.0