PCR-焦磷酸测序检测副溶血性弧菌研究

• 作者: 唐勤 相大鹏 袁慕云 许龙岩* 邹志飞 阳静
• 来源期刊: 食品安全质量检测学报
• 关键词: 副溶血性弧菌 聚合酶链式反应 焦磷酸测序 DNA 碱基序列 toxR 基因
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 页码范围: 528-535
• 字数: 4015字
• 语种: 中文

摘要

目的建立副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP )的 PCR-焦磷酸测序方法.方法根据副溶血性弧菌 toxR 基因设计扩增引物和测序引物,先用 PCR 特异性地扩增目的片段,再制备单链模版,最后用焦磷酸测序法检测 DNA 碱基序列,检测的序列为 CCAAGGATTCACAGCAGAAGCCACAGGTGCTTTT,则判断为副溶血性弧菌.结果扩增引物和测序引物表现出良好的特异性.PCR 扩增结果:20株 VP 均扩增出大小为137 bp 的 DNA 片段,而创伤弧菌等对照菌株未扩增出 DNA 条带.焦磷酸测序结果:20株副溶血性弧菌均测出与预期相符的 DNA 碱基序列,而其他对照菌株未测出 DNA 碱基序列或检测结果与测序引物后的序列不匹配.VP 标准菌株 ATCC 17802发生 A-T 突变,密码子 CCU 变成 CCA,而两个密码子都是脯氨酸的密码子.结论该方法特异性高,是快速检测 VP 有效手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	相大鹏		40	131	7.0	10.0
2	邹志飞		39	250	9.0	14.0
3	袁慕云		21	69	6.0	7.0
4	阳静		6	33	3.0	5.0
5	唐勤		2	5	2.0	2.0
6	许龙岩*		1	2	1.0	1.0