绿豆胰蛋白酶抑制剂精氨酸活性片段衍生物的克隆表达及生物学活性研究

• 作者: 付荣 单树花 李卓玉 李宗伟 武海丽 袁琳洁 赵超
• 来源期刊: 山西大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 胰蛋白酶抑制剂 Argc活性片段 二硫键 细胞增殖 细胞迁移
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 生命科学与环境科学
• 页码范围: 102-107
• 分类号: Q814
• 语种: 中文

摘要

绿豆胰蛋白酶抑制剂(MBTI)具有赖氨酸和精氨酸两个活性中心.通过化学合成MBTI-Argc编码基因,克隆到原核表达载体pGEX-4T-1并转化到大肠杆菌DH5α.表达的可溶性融合蛋白GST-Argc经GST层析柱纯化后体外测定活性表明,该片段3.3分子对1分子胰蛋白酶活力的抑制率不足5％.DTNB法定量测定二硫键表明,与天然产物相比,Argc的二硫键个数有所减少.GST-Argc对细胞增殖和迁移生物学效应的检测实验发现,GST-Argc能显著促进细胞的增殖和迁移效应.上述结果表明,MBTI-Argc与天然产物相比在结构和功能上都发生了显著变化,表现出类生长因子活性,可能在组织细胞损伤修复及创伤愈合中具有广泛应用前景.