重组大肠杆菌表达BAFF及其受体的优化研究

• 作者: 华子春 马偲洌
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: BAFF 受体 克隆 融合蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 480-483
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

构建游离态BAFF及其受体突变体的表达载体,采用大肠杆菌系统进行表达,并优化温度、诱导物浓度对蛋白表达的影响.分别提取K562细胞系mRNA和小鼠脾脏组织mRNA,进行逆转录,后经PCR扩增,获取BAFF和BAFF受体的基因片段,采用单因素实验,选取不同温度及诱导物浓度梯度诱导表达,探索重组蛋白表达的最适条件,提高目标蛋白表达量及可溶性蛋白含量.结果表明BAFF受体突变体在37℃,1 mmol/L IPTG诱导条件下表达量可达到25％左右,且可溶性蛋白含量均高于60％;可溶性BAFF的最适诱导条件为28℃,1 mmol/LIPTG,表明温度可显著提高其可溶性蛋白的含量.BAFF及其受体突变体的克隆和表达,为BAFF及其受体生物学功能的深入研究奠定了坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	华子春		125	473	11.0	17.0
2	马偲洌		1	0	0.0	0.0