表达人IL-17F重组腺病毒载体的构建及其表达产物的功能研究

• 作者: 任苏勤 刘铁连 杨吉成 盛伟华 缪竞诚 谢宇锋
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: IL-17F 腺病毒载体 构建 鉴定
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 683-687
• 页数: 5页
• 字数: 4550字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2013.09.009

摘要

目的构建表达人白细胞介素IL-17F （hIL-17F）的重组腺病毒载体（Ad-hIL-17F），为进行hIL-17F基因表达抑制血管形成和抑瘤效应的研究奠定基础。方法以pUCm-T/hIL-17F重组质粒为模板PCR扩增hIL-17F，酶切连接到带有GFP标记的pAdTrack-CMV转移质粒上，PmeⅠ线性化重组质粒pAdTrack-CMV-hIL-17F，与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌，经同源重组，获得同源重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pTrack-CMV-hIL-17F经PacⅠ线性化后转染QBI-293A细胞，收获Ad-hIL-17F，用RT-PCR和间接免疫荧光法鉴定人IL-17F基因表达。 MTT法检测hIL-17F基因表达对ECV304细胞的生长抑制作用， ELISA法检测人血管内皮生长因子（ VEGF）和血管生成素（ Ang-1）基因在293A细胞、ECV304细胞中的表达水平；实时定量RT-PCR检测Ad-hIL-17F对293A细胞中人VEGF转录的影响。结果测序显示hIL-17F序列正确，RT-PCR和间接免疫荧光法检测到了IL-17 F基因的表达。 Ad-hIL-17 F能显著抑制ECV304细胞的生长，抑制人VEGF和Ang-1基因在293 A细胞、ECV304细胞中的表达。结论成功构建和获得了hIL-17F的重组腺病毒载体（Ad-hIL-17F）， Ad-hIL-17 F可通过下调VEGF和Ang-1的分泌而抑制血管形成。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	缪竞诚	215123苏州大学医学部细胞与分子教研室	2	5	2.0	2.0
2	盛伟华	215123苏州大学医学部细胞与分子教研室	2	5	2.0	2.0
3	杨吉成	215123苏州大学医学部细胞与分子教研室	2	5	2.0	2.0
4	任苏勤	215123苏州大学医学部细胞与分子教研室	1	2	1.0	1.0
5	谢宇锋	215123苏州大学医学部细胞与分子教研室	1	2	1.0	1.0
6	刘铁连	215123苏州大学医学部细胞与分子教研室	1	2	1.0	1.0