抑癌基因PTEN真核表达载体的构建及其在人舌鳞癌SCC-4细胞系中的表达

• 作者: 刘硕硕 张斌 潘良朋 董肖婷 贾妮 郭婷婷
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: PTEN基因 质粒 SCC-4细胞系 基因转染
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 282-285,后插2
• 页数: 5页
• 分类号: R739.86
• 字数: 2741字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7694/jldxyxb20130220

摘要

目的:构建抑癌基因PTEN真核表达载体pEGFP-PTEN,并观察其在人舌鳞癌scc-4细胞系中的表达,为舌鳞癌的基因治疗提供理论依据.方法:提取人HeLa细胞总RNA,采用RT-PCR法获取PTEN全基因,克隆至pMD18-T载体,经EcoR Ⅰ和XhoⅠ双酶切后与真核表达载体pEGFP-N1连接,构建pEGFP-PTEN重组质粒.双酶切及测序鉴定后,经脂质体介导转染至体外培养的人舌鳞癌SCC-4细胞系,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞内的表达；Western blotting法检测细胞内PTEN蛋白的表达.结果:pEGFP-PTEN重组质粒双酶切,克隆的目的基因片段约为1 200 bp,测序结果与GenBank上PTEN序列完全一致；荧光显微镜下观察到pEGFP-PTEN在SCC-4细胞系中成功表达；Western blotting结果,转染组PTEN蛋白表达强度为1.07±0.15,与空转染组(0.62±0.11)和未转染组(0.57±0.08)比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:成功构建pEGFP-PTEN重组真核表达载体,该载体能在人舌鳞癌SCC-4细胞系中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭婷婷	辽宁医学院附属第一医院口腔科	9	11	2.0	3.0
2	贾妮	辽宁医学院附属第一医院口腔科	5	5	1.0	2.0
3	张斌	辽宁医学院附属第一医院口腔科	50	140	6.0	9.0
4	董肖婷	辽宁医学院附属第一医院口腔科	5	18	2.0	4.0
5	刘硕硕	辽宁医学院附属第一医院口腔科	4	4	1.0	2.0
6	潘良朋	辽宁医学院附属第一医院口腔科	2	6	1.0	2.0