犬钩虫(Ancylostoma caninum)daf-1基因的克隆和表达鉴定

• 作者: 乔莹 杨玉荣
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 犬钩虫 TGF-βⅠ型受体 Acdaf-1 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 64-68
• 页数: 5页
• 分类号: R383
• 字数: 5173字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2013.01.014

摘要

目的 对犬钩虫(Ancylostoma caninum)TGF-βⅠ型受体daf-1基因进行了克隆和鉴定,并在原核系统中进行表达.方法 以犬钩虫总RNA为模板,用RT-PCR对犬钩虫TGF-β受体基因daf-1的cDNA进行扩增和克隆,用PCR筛选阳性克隆,双酶切鉴定并测序.将测序正确的阳性克隆双酶切后构建到表达载体pET-32m中,转化到E.coli DH5α内,提取质粒,酶切鉴定阳性,再转化入表达宿主E.coli BL21(DE3)菌株内,对转化菌株用IPTG进行诱导培养.收集培养液,破菌、离心进行SDS-PAGE检测重组蛋白的表达.蛋白纯化后进行免疫,并通过免疫印迹检测在钩虫各时期的表达.结果 电泳发现转化了重组质粒的菌株在IPTG诱导下表达的重组蛋白为58 kDa,在钩虫各时期都有AcDAF-1的表达.结论 成功进行了犬钩虫TGF-βⅠ型受体daf-1基因的扩增、克隆和表达并在各期检测到该蛋白的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨玉荣	厦门大学生命科学学院寄生动物研究室	33	91	5.0	8.0
2	乔莹	厦门大学生命科学学院寄生动物研究室	6	15	3.0	3.0