应用枯草芽孢杆菌表达系统制备肠道病毒71型VP1蛋白

• 作者: 刘威龙 刘映霞 周伯平 张国良 杨桂林 聂广 詹森林 陈圆圆
• 来源期刊: 中华实验和临床病毒学杂志
• 关键词: 肠道病毒属 病毒包膜蛋白质类 芽孢杆菌,枯草
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 403-405
• 页数: 3页
• 字数: 2265字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2013.06.002

摘要

目的 利用枯草芽孢杆菌系统表达肠道病毒71型(EV71)病毒VP1蛋白.方法 使用基因特异性引物扩增VP1开放读码框(ORF),构建包含VP1完整开放读码框的pSac-VP1穿梭载体.根据枯草芽孢杆菌表达系统双交叉同源重组的特点,将EV71的结构抗原基因VP1整合在枯草芽孢杆菌sacA染色体,并经测序鉴定.使用VP1特异性抗体,通过蛋白印记(Western-Blot)鉴定枯草芽孢杆菌中VP1蛋白的表达情况.结果 成功克隆EV71的VP1基因,长度1361 bp,并将其克隆入穿梭载体pSac-Kan.测序结果显示VP1基因成功整合如sacA染色体.Western-Blot证实VP1抗原在枯草芽孢杆菌的成功表达,相对分子质量约35×103.结论 利用枯草芽孢杆菌表达系统成功制备EV71病毒VP1抗原,为后续EV71诊断试剂、疫苗研发奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨桂林		30	162	8.0	10.0
2	周伯平		41	249	9.0	13.0
3	刘映霞		51	325	10.0	15.0
4	刘威龙		17	62	4.0	7.0
5	张国良		50	165	7.0	8.0
6	聂广		45	232	8.0	11.0
7	詹森林		6	13	2.0	3.0
8	陈圆圆		3	3	1.0	1.0