人Polo样激酶1活性缺失突变体和结构域在293细胞中的瞬时表达

• 作者: 刘萱 曹诚 李伟 李平 江其生
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: Polo样激酶1 激酶 结构域 真核表达
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 478-480
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2692字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2013.04.007

摘要

目的：构建人Polo样激酶1（Plk1）活性缺失突变体及结构域突变体的真核表达载体，并在293细胞中表达。方法：用二次PCR方法扩增Plk1基因并点突变，将82位赖氨酸突变为精氨酸，定向克隆到pcDNA3-Flag载体中；用普通PCR方法扩增Plk1激酶区域及Polo盒区域（PBD）基因，定向克隆到pcDNA3-Flag载体中；将上述质粒转染293细胞进行瞬时表达，Western印迹检测Plk1蛋白的表达。结果：构建了Flag-Plk1（K82R）、Flag-Plk1KD、Flag- Plk1PBD真核表达质粒，在293细胞中均可有效表达，蛋白相对分子质量分别为68×103、45×103、31×103。结论：在293细胞中表达了Flag-Plk1（K82R）、Flag-Plk1KD、Flag-Plk1PBD蛋白，有助于进一步探究Plk1对底物的功能。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹诚	军事医学科学院生物工程研究所	112	536	10.0	19.0
2	李平	军事医学科学院生物工程研究所	63	162	6.0	9.0
3	刘萱	军事医学科学院生物工程研究所	42	105	6.0	8.0
4	江其生	第二炮兵总医院中心实验室	63	285	10.0	14.0
5	李伟	军事医学科学院生物工程研究所	47	252	9.0	14.0