创伤弧菌外膜蛋白OmpU的基因克隆与表达

• 作者: 吴唯维 李盼 李素一 林天龙 林晨韬 柯翎 许斌福 陈叙
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 创伤弧菌 外膜蛋白OmpU 克隆 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 517-521
• 页数: 5页
• 分类号: S941
• 字数: 3927字
• 语种: 中文

摘要

创伤弧菌是导致鳗鲡产生体表溃疡死亡的重要致病菌.本研究克隆了创伤弧菌FJ03-X2株外膜蛋白基因(ompU),构建含该基因的原核表达载体,命名为pET-32a-ompU,将其转化到大肠杆菌E.coli中进行融合表达.37℃,0.5 mmol·L-1的IPTG诱导4h,融合蛋白rompU以可溶形式表达,采用Ni-NTA亲和层析法纯化融合蛋白,SDS-PAGE显示纯化后的rompU为与预期大小一致的单一条带.将纯化的rompU免疫SD级大鼠,ELISA检测收获的多克隆抗体血清效价,并通过Western-blot证实该OmpU多克隆抗体可以识别创伤弧菌FJ03-X2株中的天然外膜蛋白OmpU.