创伤弧菌外膜蛋白多克隆抗体的制备及其特性分析

• 作者: 古小莉 李刘冬 李惠青 李永贤 陈洁文
• 来源期刊: 中国渔业质量与标准
• 学科: 农学
• 关键词: 创伤弧菌 外膜蛋白 多克隆抗体 Western Blot ELISA
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 检验与检测
• 页码范围: 45-50
• 页数: 6页
• 分类号: S91
• 字数: 4991字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1833.2017.05.007

摘要

[目的]制备创伤弧菌特异性抗体,为建立免疫学快速检测创伤弧菌提供参考依据.[方法]以创伤弧菌外膜蛋白作为抗原,将抗原分多次免疫新西兰大白兔获得特异性多克隆抗体,采用蛋白G亲和层析法纯化多克隆抗体,通过间接ELISA和Western Blot测定创伤弧菌外膜蛋白多克隆抗体的效价、敏感性和特异性.[结果]实验获得了纯度较高的创伤弧菌外膜蛋白多克隆抗体,效价为1∶64000;抗体对创伤弧菌具有高的特异性,它与多株致病菌均无明显交叉反应,其对创伤弧菌检测灵敏度为103 CFU/mL;Western Blot分析表明,制备的多克隆抗体能识别创伤弧菌外膜蛋白,创伤弧菌外膜蛋白具较强的抗原性.[结论]创伤弧菌外膜蛋白多克隆抗体具有较高特异性和灵敏性,可应用于创伤弧菌的快速、灵敏的免疫学检测.