瓜类褪绿黄化病毒p22基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

• 作者: 刘珊珊 古勤生 孙虎 施艳 王振跃 袁媛
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甜瓜 瓜类褪绿黄化病毒 P22 原核表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 762-766
• 分类号: S652
• 语种: 中文

摘要

以被瓜类褪绿黄化病毒(Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)侵染的甜瓜叶片为供试材料,采用RT-PCR方法克隆其P22蛋白基因,并将其连接到原核表达载体pGex-4T-3上,PCR验证及克隆测序确定开放阅读框的正确性.将重组载体pGexp22转化大肠杆菌BL21菌株,诱导表达,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,p22基因在大肠杆菌BL21中得到了高效表达.以表达的蛋白作为抗原,免疫家兔,制备了CCYV P22的特异性抗血清.ACP-ELISA检测结果表明,血清效价高达1.28×105.Western blot检测甜瓜叶片,结果表明抗血清能够特异性地检测CCYV侵染的甜瓜叶片中的CCYV P22蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	古勤生	中国农业科学院郑州果树所	60	585	14.0	22.0
2	孙虎	河南省农业科学院植物保护所	24	143	8.0	10.0
3	王振跃	河南农业大学植物保护学院	42	725	15.0	25.0
4	刘珊珊	中国农业科学院郑州果树所	16	60	5.0	7.0
5	施艳	河南农业大学植物保护学院	29	136	7.0	10.0
6	袁媛	河南农业大学植物保护学院	3	19	3.0	3.0