TRIM25及其缺失突变体真核表达载体的构建及表达

• 作者: 曹诚 李伟 李平 陈婷
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 泛素连接酶 TRIM25 突变体 细胞表达 RNA病毒
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 页码范围: 328-330
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2164字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2013.03.006

摘要

目的：扩增先天性免疫中具有重要功能的泛素连接酶TRIM25及其不同结构域的cDNA，构建带有不同标签的融合蛋白载体并进行细胞表达。方法：以TRIM25 cDNA为模板，PCR扩增不同结构域cDNA，扩增产物及载体经酶切、连接后，转化大肠杆菌DH5α，挑克隆，提取重组质粒后酶切鉴定、测序，将测序正确的重组质粒转染293细胞，用Western印迹对融合蛋白的表达进行鉴定。结果：TRIM25、Two-BOX结构域、SPRY结构域以正确读框插入Flag-pcDNA3.0，TRIM25以正确读框插入pCMV-Myc，RING结构域、CDD结构域、Two-BOX结构域以正确读框插入pEGFP-c1，上述重组质粒能够在293细胞中表达。结论：构建了TRIM25及其突变体的重组表达质粒并获得表达，为研究不同RNA病毒通过与TRIM25作用抑制宿主功能提供了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹诚	军事医学科学院生物工程研究所	112	536	10.0	19.0
2	李平	军事医学科学院生物工程研究所	63	162	6.0	9.0
3	陈婷	军事医学科学院生物工程研究所	18	123	5.0	10.0
4	李伟		8	14	2.0	3.0