弓形虫乳酸脱氢酶LDH2基因启动子的克隆及鉴定

• 作者: 侯香华 宋秀宇 张加勤
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫 乳酸脱氢酶 启动子 荧光素酶
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 349-353,365
• 页数: 6页
• 分类号: R382
• 字数: 4177字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2013.04.007

摘要

目的 克隆弓形虫乳酸脱氢酶LDH2基因启动子并进行初步鉴定.方法 PCR扩增出LDH2基因5′侧翼序列系列截短突变体,定向插入载体pTX3–basic的Kpn I / Xhol I酶切位点之间,转化大肠埃希菌Top 10,氨苄西林筛选,建立重组LDH2基因5′侧翼序列系列截短突变体荧光素酶表达载体.转染刚地弓形虫速殖子,利用荧光素酶检测试剂盒测定所克隆片段的启动转录活性.结果 成功扩增出LDH2基因5′侧翼序列系列突变体;系列重组荧光素酶表达质粒经PCR、酶切及测序鉴定正确无误;系列重组荧光素酶表达质粒在弓形虫速殖子中的相对活性与阴性对照pTX3-basic基本相同,而在弓形虫缓殖子中,除pTX3-293和pTX3-193外,其他重组荧光素酶活性均是阴性对照pTX3-basic的40~50倍之多,是阳性对照pTX3-control的1.2~1.5倍,说明插入片段具有较强的启动子活性.结论 成功定位并克隆弓形虫LDH2基因启动子,为今后研究LDH2基因上游调控序列提供试验和理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋秀宇	厦门大学附属第一医院检验科	26	104	6.0	8.0
2	侯香华	厦门大学附属第一医院检验科	7	18	2.0	4.0
3	张加勤	厦门大学附属第一医院检验科	22	70	5.0	7.0