小鼠microRNA-21?慢病毒抑制载体的构建及鉴定

• 作者: 伍伟锋 刘艳丽 覃玉桃
• 来源期刊: 当代医学
• 关键词: microRNA miR-21慢病毒抑制载体 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2013,（15）
• 页码范围: 35-37
• 字数: 1721字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-4393.2013.15.018

摘要

目的构建microRNA-21(miR-21)慢病毒抑制载体,为研究miR-21在小鼠体内的功能及作用机制打下基础.方法利用miR-21前体并将其克隆入LV3 pGLV-H1-GFP质粒中,经酶切及测序鉴定,利用脂质体将鉴定的阳性重组LV3 pGLV-H1-GFP-miR-21抑制载体、PG-P1-VSVG和pCMV-dR 3个质粒转染到HEK-293 T 细胞,将所得病毒感染293 T细胞,检测病毒滴度,并将制备的病毒颗粒感染乳鼠心肌细胞和尾静脉注射小鼠,检测miR-21在小鼠体内的表达.结果酶切及测序结果证明成功构建了LV3 pGLV-H1-GFP-miR-21重组质粒,并成功包装成慢病毒,病毒滴度为2.4×109 TU/ml,重组病毒成功感染心肌细胞,同时在Balb/c小鼠心脏有表达.结论成功构建miR-21慢病毒抑制载体,获得高效表达miR-21的慢病毒颗粒,为miR-21的进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	覃玉桃	广西 530021 广西医科大学第一附属医院放疗科 广西医科大学第一附属医院心内科	1	1	1.0	1.0
2	刘艳丽	广西 530021 广西医科大学第一附属医院放疗科 广西医科大学第一附属医院心内科	1	1	1.0	1.0
3	伍伟锋	广西 530021 广西医科大学第一附属医院放疗科 广西医科大学第一附属医院心内科	1	1	1.0	1.0