小鼠β-防御素3的原核表达、表达条件优化及其抗菌活性

• 作者: 佘晓玲 易旭 李明远 江滟 王涛 綦廷娜
• 来源期刊: 江苏医药
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠β-防御素3 原核表达
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 128-131
• 分类号: R392
• 语种: 中文

摘要

目的 运用基因工程方法获得重组小鼠β-防御素3(MBD3),优化表达条件,并研究其抗菌活性.方法 通过反转录PCR方法从小鼠肺组织中扩增Mbd3基因,构建其原核表达质粒,将该质粒转入大肠埃希菌表达菌株Rosetta-gami(2).优化融合蛋白的表达条件.通过亲和层析、凝血酶酶切、超滤浓缩得到MBD3的重组成熟肽(rMBD3),并采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳和Western blot鉴定其正确性.采用微量液体抗菌实验检测rMBD3对多种常见病原性细菌和真菌的抗菌活性.结果 获得表达MBD3融合蛋白(fMBD3)的工程菌,fMBD3的表达量可达菌体总蛋白的62.9％,可溶性fMBD3约为1.15 g/L.纯化的rMBD3对单细胞真菌和革兰阳性菌显示出较好的抑菌活性.结论 rMBD3具有一定的抗菌活性,为进一步研究该多肽的其他生物学活性及其应用提供参考依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明远	四川大学华西医学中心基础与法医学院微生物学教研室	80	362	11.0	14.0
2	王涛	贵阳医学院微生物学教研室	28	53	5.0	5.0
3	易旭	贵阳医学院微生物学教研室	17	56	5.0	6.0
4	江滟	贵阳医学院微生物学教研室	16	64	5.0	6.0
5	佘晓玲	贵阳医学院微生物学教研室	11	14	2.0	3.0
6	綦廷娜	贵阳医学院微生物学教研室	10	41	5.0	6.0