人Hiwi miRNA干扰质粒的构建及其鉴定

• 作者: 张国新 成道祥 施瑞华 蒋建霞 郝波
• 来源期刊: 实用临床医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Hiwi基因 miRNA干扰 真核表达质粒 肝癌
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4,27
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3370字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7619/jcmp.201303001

摘要

目的 构建人Hiwi基因miRNA干扰质粒,探讨其对肝癌7721细胞株中Hiwi基因和蛋白表达的阻抑作用.方法 根据Homo sapiens Hiwi基因序列,设计RNA干扰靶点,构建4对Hiwi的pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR miRNA及1对无效对照miRNA干扰质粒并将其转染至肝癌7721细胞中,通过RT-PCR和Western blot检测7721细胞中Hiwi mRNA和蛋白的表达水平.结果 成功构建了4对Hiwi miRNA干扰质粒及无效干扰质粒,测序表明Hiwi干扰序列及读框完全正确.RT-PCR和Western blot结果显示,与未转染组及阴性对照组比较,转染该载体能有效下调7721细胞株中mRNA和蛋白的表达.结论 成功构建了Hiwi的干扰表达载体,为进一步探讨Hiwi基因在肝癌中的相关机制提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	施瑞华	南京医科大学第一附属医院消化科	174	1190	17.0	24.0
2	郝波	南京医科大学第一附属医院消化科	64	379	10.0	15.0
3	张国新	南京医科大学第一附属医院消化科	125	705	14.0	19.0
4	蒋建霞	南京医科大学第一附属医院消化科	24	116	7.0	10.0