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摘要:
为建立油葵SRAP-PCR的反应体系,采用单因素试验法,对Mg2+、dNTPs、引物浓度、TaqDNA聚合酶、模板DNA分别设置5~7个水平梯度,筛选出适宜的用量范围,以此为基础,再通过L16(45)正交试验设计,对影响SRAP-PCR的5个因素进行优化,建立了油葵SRAP-PCR的最佳反应体系:20μL体系中含10×Buffer 2μL,Mg2+2.75 mmol/L,dNTPs 0.18 mmol/L,TaqDNA聚合酶1.25 U,正反引物各0.3μmol/L,模板DNA 60 ng,最佳退火温度为52.2℃。用22份油葵材料对该体系进行验证,结果显示扩增条带清晰、多态性高,说明该体系稳定可靠,可有效的用于油葵种质资源的鉴定、遗传图谱构建等研究。
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文献信息
篇名 油葵SRAP-PCR反应体系的建立与优化
来源期刊 中国农学通报 学科 农学
关键词 油葵 SPAP-PCR 反应体系
年,卷(期) 2013,(33) 所属期刊栏目 生物技术-研究报告
研究方向 页码范围 296-301
页数 6页 分类号 S565.5
字数 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1000-6850.2013.33.052
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 侯建华 内蒙古农业大学农学院 58 683 15.0 24.0
2 于志贤 内蒙古农业大学农学院 4 36 4.0 4.0
传播情况
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引文网络
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研究主题发展历程
节点文献
油葵
SPAP-PCR
反应体系
研究起点
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中国农学通报
旬刊
1000-6850
11-1984/S
大16开
北京朝阳区麦子店街22号楼中国农学会期刊处
2-772
1984
chi
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