增菌-PCR法与传统方法检测猪肉中单增李斯特菌的比较研究

• 作者: 余东敏 杨大进 王晓英 裴晓燕 郭云昌 闫琳
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 增菌-PCR 猪肉样本 单增李斯特菌检测
• 年，卷（期）: 2013,（15）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3021-3024
• 页数: 4页
• 分类号: R446.5
• 语种: 中文

摘要

目的 比较增菌-PCR法与传统方法检测猪肉中单增李斯特菌的敏感性、特异性和时效性.方法 以hlyA基因为基础,选择特异性引物,建立并优化单增李斯特菌PCR检测方法.选用CMCC54004,进行人工染菌实验,染菌量分别为每25 g样本1.3 CFU、13 CFU、1.3×102 CFU、1.3×103 CFU、1.3×104 CFU、1.3×105 CFU和1.3×106 CFU.在总增菌的不同时间点上,取各染菌量下的培养液1ml,提取DNA进行PCR检测.在总增菌46 h划线接种选择性平板,用传统方法进行分离鉴定,比较两种方法检测的敏感性和特异性.采集24份市售猪肉样本,应用这两种方法进行检测,进一步比较两者的阳性检出率.结果 人工染菌样本在增菌46 h后,PCR法检出限可达每25 g猪肉样本1.3 CFU,与传统方法检出限一致,但比传统方法需时提前3d～5d.24份市售样本,增菌-PCR法的阳性率为70.83％ (17/24),与传统方法结果一致.结论 增菌-PCR法具有快速简便、敏感特异等优点,较传统方法大大缩短了检出时限.