组氨酸标签标记的口蹄疫重组病毒的制备及鉴定

• 作者: 岳城 张岩 杨帆 杨波 殷宏 王松豪 郑海学
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫 标签 标记疫苗
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 960-966
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 4831字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.06.014

摘要

为了鉴定口蹄疫病毒(FMDV)插入位点并获得标记的重组病毒,本研究利用口蹄疫病毒反向遗传操作技术,在RGD基序后第9位和第10位氨基酸处(+9)引入组氨酸(His)标签,获得了含有His标签的FMDV全长cDNA克隆(命名为prAsia1 9His).将prAsia1 9His质粒转染BHK 21细胞后,能够出现典型的细胞病变,对收获的病毒分别用RT PCR、间接免疫荧光进行鉴定,结果证实,成功拯救了含His标签的重组病毒(命名为rAsia19His),该重组毒株能够稳定表达His标签.最后,比较测定了其对BHK 21细胞和乳鼠的致病性,结果表明,该重组毒株与亲本毒株(rAsia1)具有相似的生物学特性.含有标签标记的口蹄疫病毒的成功拯救,为深入研究口蹄疫病毒的致病机制以及分子标记疫苗奠定了基础.