牛分枝杆菌CFP-10基因的原核表达及其表达产物的变态反应原性的鉴定

• 作者: 刘洪涛 宋林 尹尧 张海丽 王君伟 邵建伟 高明春
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: CFP-10 迟发型变态反应 牛结核病 原核表达
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 页码范围: 346-350
• 页数: 5页
• 分类号: S852.618
• 语种: 中文

摘要

以牛分枝杆菌基因组为模板,PCR扩增获得CFP-10基因,并连入pET-32a(+)载体,获得了重组质粒pET-32a-CFP-10.将重组质粒转入宿主菌大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后,重组蛋白rCFP-10以可溶形式表达并被纯化,将rCFP-10在致敏豚鼠皮内做迟发型变态反应(DTH)检测,并以PPD作为阳性对照.结果显示,测得rCFP-10组豚鼠皮肤红斑直径平均值为10 mm,接近于PPD组(13 mm).结果证明,以pET-32a(+)为载体进行原核表达,获得的重组蛋白rCFP-10依然具有较强的迟发型变态反应原性,同时也证明了CFP-10具有作为皮试诊断试剂抗原的潜力,这一结果为牛结核病新型DTH皮试诊断的研究奠定了基础.