转氨酶ATA117基因在大肠杆菌BL21（DE3）中的重组表达及产酶条件优化

• 作者: 吴坚平 徐刚 杨立荣 王璐
• 来源期刊: 化学反应工程与工艺
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组转氨酶 响应面法 优化培养基
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 513-521
• 页数: 9页
• 分类号: Q555+.6
• 字数: 3839字
• 语种: 中文

摘要

采用基因工程的方法构建重组大肠杆菌得到重组菌Eco（pETDuet-ATA117），实现了转氨酶ATA117的重组表达。使用响应面法对重组大肠杆菌摇瓶发酵产酶培养基进行了优化并对转氨酶诱导条件进行研究。首先采用二水平部分因子设计筛选确定培养基中对转氨酶ATA117酶活有显著影响的3种培养基组分，即甘油、酵母粉和胰蛋白胨。然后进行最陡爬坡实验确定最佳响应面区域，最后通过Box-Behnken设计确定各成分的最佳浓度。采用该优化培养基，转氨酶酶活为391.7 U/L，分别是基础培养基和单因素优化培养基酶活的3.13倍和1.22倍。对转氨酶的诱导条件进行了研究，得出最适诱导温度24℃，光密度值（OD）为0.8，此条件下进行诱导，异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）浓度1 mmol/L，诱导时间15 h，最终转氨酶活力达到713.7 U/L。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨立荣	浙江大学化学工程与生物工程学系	117	903	14.0	25.0
2	王璐	浙江大学化学工程与生物工程学系	25	80	4.0	8.0
3	徐刚	浙江大学化学工程与生物工程学系	84	500	11.0	17.0
4	吴坚平	浙江大学化学工程与生物工程学系	99	759	12.0	23.0