基于vhhP2基因的SYBR Green I实时定量PCR检测哈维氏弧菌方法的建立

• 作者: 刘智超 廖梅杰 张正 李彬 栾晶 王印庚 王岚 荣小军 陈贵平
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: vhhP2基因 哈维氏弧菌 实时定量PCR SYBR Green I
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 611-620
• 页数: 10页
• 分类号: S942
• 字数: 6628字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2014.00611

摘要

根据哈维氏弧菌(Vibro harveyi)溶血素基因vhhP2的保守序列设计特异性引物,建立了SYBR Green I实时定量PCR检测哈维氏弧菌的方法。构建含vhhP2基因的重组质粒作为标准品,进行SYBR Green I实时定量PCR,在Tm 为60℃时,扩增产物的熔解曲线仅有一个特异峰,扩增所得标准曲线为 y=-3.331x+37.48,相关系数为0.998,扩增效率为1,最低可检测到7个拷贝。实验结果表明该检测技术具有较高的特异性、敏感性和重复性,对哈维氏弧菌病的快速诊断和流行病学调查有重要意义。