基于gyrB基因的SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测病原灿烂弧菌

• 作者: 于永翔 刘智超 廖梅杰 张正 战文斌 李彬 王印庚 荣小军
• 来源期刊: 渔业科学进展
• 学科: 农学
• 关键词: gyrB基因 灿烂弧菌 实时定量PCR SYBR Green Ⅰ
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 页码范围: 134-142
• 页数: 9页
• 分类号: S963.7
• 字数: 5293字
• 语种: 中文

摘要

灿烂弧菌Vibrio splendidus是多数海水养殖动物的主要致病菌,对养殖业危害较大.本研究根据灿烂弧菌gyrB基因的保守序列设计特异性引物,建立了SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测灿烂弧菌的方法.构建合gyrB基因的重组质粒作为标准品,进行SYBR Green Ⅰ实时定量PCR,在Tm为62℃时,扩增产物的熔解曲线仅有一个单特异峰,扩增所得标准曲线为y=-3.338x+37.67,相关系数为0.999,扩增效率为0.99,最低能检测到20个拷贝.实验结果表明,该检测技术具有较高的特异性、敏感性和重复性,对灿烂弧菌病的快速诊断和流行病学调查有重要意义.