结核分枝杆菌ESAT6、CFP10基因DNA疫苗对小鼠免疫原性的初步研究

• 作者: 曹旭东 李志强 李跃峰 温书香 王慧勤 纪太旺 赵庆亮 陈创夫 陈鹏博
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 ESAT6 CFP10 DNA疫苗 卡介苗
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 458-463
• 页数: 6页
• 分类号: R378
• 字数: 4484字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2014.05.006

摘要

目的 研究ESAT6、CFP10基因DNA疫苗分别与卡介苗联合免疫小鼠,以诱导免疫效果.方法 以构建的真核表达载体pEGFP-N1ESAT6、pEGFP-N1-CFP10与卡介苗共同免疫随机分成8组的80只小鼠,分别标记为:生理盐水组(SLYS)、卡介苗组(KJM)、pEGFP N1组(P-N1)、pEGFP-N1 ESAT6组(P-N1-E)、pEGFP N1-CFP10组(P-N1-C)、卡介苗加pEGFP-N1组(K+P-N1)、卡介苗加pEGFP-N1-ESAT6组(K+P-N1-E)和卡介苗加pEGFP-N1 CFP10组(K+P-N1-C).每只小鼠皮内注射100μL卡介苗,每只小鼠肌肉注射50μg质粒,每组共注射3次.以纯化的ESAT6、CFP10蛋白作为抗原,用DOT ELISA方法检测小鼠血清中的抗体;用ELISA方法检测小鼠血清中IFN-γ的变化.结果 免疫3次后的小鼠血清中检测到针对CFP10蛋白的抗体,未检测到针对ESAT6蛋白的抗体.但二者血清中IFNγ水平都有显著上升,K+P N1-C和K+P-N1-E免疫3次后,测得的IFN-γ平均含量为(107.591±7.3281)pg/mL和(95.7503±9.0184) pg/mL,显著高于免前、一免、二免(P＜0.01).结论 结核分枝杆菌ESAT6,CFP10基因DNA疫苗和卡介苗联合应用后可诱导小鼠产生有效的细胞免疫应答,为DNA疫苗的研究奠定一定的基础.