结核分枝杆菌CFP10、ESAT6蛋白的原核表达、纯化及ELISPOT检测方法的建立与应用

• 作者: 张焰 徐东芳 徐元宏 王东萍 王庆 王晓玮 程筱雯 韦薇
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结核病诊断 γ-干扰素 ELISPOT CFP10 ESAT6
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1347-1351
• 页数: 5页
• 分类号: R446-61
• 字数: 3889字
• 语种: 中文

摘要

以结核分枝杆菌CFP10、ESAT6蛋白原核表达、纯化体系为基础,建立稳定的ELISPOT方法;检测164份疑似结核患者标本的外周血ELISPOT,与临床诊断及T-SPOT·TB结果对比. 表达所得重组蛋白浓度和纯度如下:CFP10 为0. 5 mg/ml,84%;ESAT6为4 mg/ml,98%. ELISPOT方法最佳实验条件为每孔细胞密度2 × 105/孔,CFP10、ESAT6蛋白抗原浓度分别为10 μg/孔,细胞孵育时间20 h. ELISPOT的灵敏度与特异度分别为88. 50%、82. 35%,检测结果与 T-SPOT·TB 方法结果一致(χ2 =0. 57).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐元宏	安徽医科大学第一附属医院检验科	281	2373	24.0	32.0
2	王庆	安徽省胸科医院检验科	34	163	6.0	10.0
3	程筱雯	安徽医科大学第一附属医院检验科	18	66	5.0	6.0
4	徐东芳	安徽省胸科医院检验科	16	74	5.0	8.0
5	王东萍	安徽省胸科医院检验科	18	85	5.0	7.0
6	王晓玮	安徽医科大学第一附属医院检验科	6	11	2.0	3.0
7	张焰	安徽医科大学第一附属医院检验科	3	6	1.0	2.0
8	韦薇	安徽省胸科医院检验科	2	5	1.0	2.0