CFP10/ESAT6融合蛋白-ELISPOT方法的建立及其在结核分枝杆菌感染诊断中的应用价值

• 作者: 叶丽萍 吴雪琼 张俊仙 张广宇 张涛 李峤珂 李楠 梁建琴 梁艳 王兰 王安生 阳幼荣
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 酶联免疫斑点试验(ELISPOT) CFP10/ESAT6融合蛋白 结核病 γ-干扰素 诊断
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 551-554
• 分类号: R521
• 字数: 3876字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.06.010

摘要

目的 建立应用酶联免疫斑点试验(Enzyme Linked -Immunospot Assay,ELISPOT)检测结核分枝杆菌感染的方法,评价CFP10/ESAT6融合蛋白抗原在检测结核分枝杆菌感染中的应用价值.方法 通过比较不同的实验条件确定ELISPOT检测结核分枝杆菌感染方法的最佳细胞浓度、孵育时间、蛋白抗原浓度等,建立ELISPOT方法.以PPD皮肤试验作对照.结果 ELISPOT方法的最佳实验条件为:每孔细胞浓度2×105,CFP10/ESAT6融合蛋白抗原浓度20～40μg/mL,细胞孵育时间20h.应用PPD皮试检测30例健康体检者、38例非结核疾病患者和40例结核病患者的阳性率分别为40.0%、0%、72.5%,而ELISPOT检测的阳性率分别为20.0%、10.5%、92.5%.应用ELISPOT检测40例结核病痰菌阳性组和阴性组的灵敏度分别为94.4%、90.9%.结论 应用CFP10/ESAT6融合蛋白作为抗原建立的ELISPOT方法可初步应用于诊断结核分枝杆菌感染、辅助结核病诊断.