朱黄青霉α-葡聚糖酶在毕赤酵母中的高效表达

• 作者: 吴兆鹏 常国炜 曾练强 梁达奉 马步 黄曾慰
• 来源期刊: 广西科学
• 学科: 生物学
• 关键词: α-葡聚糖酶 密码子优化 毕赤酵母 重组菌
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 甘蔗生物炼制
• 页码范围: 614-618
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3737字
• 语种: 中文

摘要

【目的】提高朱黄青霉（Penicillium minioluteum ）α-葡聚糖酶（Dextranase）基因在毕赤酵母（Pichia pastoris）中的表达水平。【方法】根据毕赤酵母的密码子偏爱对酶基因进行优化与合成。优化后的基因片段与载体 pGAPZαA 连接，转化毕赤酵母 KM71 H。【结果】获得组成型分泌表达α-葡聚糖酶的工程菌 KM71 H／pGAPZαA-dex。发酵工艺试验中，摇瓶培养144 h，酶活为153 U／mL。6．8 L发酵罐补料分批培养92 h，酶活达到1218 U／mL。【结论】该工程菌以甘油作为碳源，发酵调控简单，产酶水平较高，具有适用于大规模生产的潜力。