重组CARDs TX融合蛋白的表达纯化与复性

• 作者: 于晓旭 刘运德 李雪 牛健 鲍会静
• 来源期刊: 天津医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: CARDsTX 质粒构建 点突变 蛋白纯化 蛋白复性
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 184-187
• 页数: 4页
• 分类号: Q7
• 字数: 3520字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建pET28α-CARDs TX重组质粒,诱导CARDs TX融合蛋白表达,并对其进行纯化与复性研究.方法:将CARDsTX基因(MPN 372)克隆入pET28α载体,经8次点突变获得pET28α-CARDs TX重组质粒.转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达.利用亲和层析技术纯化蛋白并通过SDS-PAGE和Western blot检测CARDs TX的表达和纯化效果.利用尿素梯度复性法和扩大体积透析法对蛋白进行复性研究.结果:酶切和测序结果证明pET28α-CARDs TX重组质粒的DNA序列完全正确,在BL21中CARDsTX融合蛋白可高效表达,并可获得高纯度目的蛋白.利用扩大体积透析法对目的蛋白复性有较好的效果.结论:成功构建出pET28α-CARDs TX重组质粒,且CARDs TX可在大肠杆菌中高效表达,并可获得高纯度的目的蛋白,为深入研究CARDs TX的生物学特性奠定了基础

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘运德	天津医科大学医学检验学院	80	394	11.0	17.0
2	李雪	天津医科大学医学检验学院	26	121	7.0	10.0
3	鲍会静	天津医科大学医学检验学院	10	44	4.0	6.0
4	牛健	天津医科大学医学检验学院	1	5	1.0	1.0
5	于晓旭	天津医科大学医学检验学院	1	5	1.0	1.0