人乳头瘤病毒18型 L1蛋白在大肠埃希菌中的可溶性表达及病毒样颗粒的形成

• 作者: 付生芳 余黎 包红 安静 寇桂英 李雄雄 白幕群
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠埃希菌表达系统 人乳头瘤病毒18型 L1蛋白 优化 可溶性表达 病毒样颗粒
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 11-16
• 页数: 6页
• 分类号: R373.9
• 字数: 3606字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2014.05.003

摘要

目的：利用大肠埃希菌系统可溶性表达人乳头瘤病毒18型（HPV18）L1蛋白，纯化和重组装获得HPV18病毒样颗粒（VLPs），为进一步研制HPV18基因工程疫苗奠定基础。方法首先按大肠埃希菌密码子偏好进行HPV18L1全基因合成，经PCR扩增出截短的HPV18L1基因，构建重组表达载体PET30a-L1，通过优化表达在大肠埃希菌BL21中可溶性表达L1蛋白，其次采用硫酸铵沉淀、离子交换层析、疏水层析后，获得高纯度的的L1蛋白，再通过解聚和重聚获得VLPs。结果全基因优化并截短的HPV18L1蛋白在大肠埃希菌系统中以可溶形式表达，纯化后的蛋白纯度达到90％以上，电镜下观察到直径为60 nm的VLPs颗粒。结论利用大肠埃希菌系统可溶性表达非融合HPV18L1蛋白，并获得均一的VLPs颗粒，为疫苗的开发奠定基础。