稳转STAT6-RNAi细胞株的构建及功能鉴定

• 作者: 张玉山 高国生
• 来源期刊: 中国生化药物杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒包装 STAT6 RNAi干涉 感染 HepG2细胞
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 51-54,58
• 页数: 5页
• 分类号: R36.1
• 字数: 4357字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨RNAi慢病毒载体对HepG2稳转细胞株增殖、迁移的影响.方法 感染实验分为4组:空白对照组(未经处理的HepG2细胞),阴性对照组(只感染pLVTHm空病毒),感染pLVTHm-STAT6-RNAi组,感染pLVTHm-STAT6-ORF组.运用病毒感染HepG2细胞获得稳定表达STAT6-ORF和STAT6-RNAi的细胞株,利用PCR和Western blot的方法检测稳定细胞株中STAT6的表达丰度.CCK-8法检测稳转细胞株的细胞活性及Transwell实验检测稳转细胞迁移能力变化.结果 通过TET的筛选,成功获得了STAT6-ORF以及STAT6-RNAi的HepG2稳定表达细胞株.与对照组细胞相比,过表达STAT6-ORF转染的细胞增殖快(F=4.279,P =0.021),迁移率高;而STAT6-RNAi转染后,细胞增殖缓慢,随培养时间延长及传代(HepG2传到第三代细胞绝大部分细胞已经死亡),细胞逐渐崩解、漂浮死亡,细胞活性显著降低(F=290.114,P＜0.001),迁移能力显著下降.结论 成功构建STAT6-RNAi和STAT6-ORF稳定株,为后期建立动物模型,体内验证STAT6的生物学功能奠定了物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张玉山	南阳市中心医院感染科	16	49	4.0	6.0
2	高国生	宁波市感染病医院肝病科	2	18	1.0	2.0