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稳转STAT6-RNAi细胞株的构建及功能鉴定
稳转STAT6-RNAi细胞株的构建及功能鉴定
作者:
张玉山
高国生
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
慢病毒包装
STAT6 RNAi干涉
感染
HepG2细胞
摘要:
目的 探讨RNAi慢病毒载体对HepG2稳转细胞株增殖、迁移的影响.方法 感染实验分为4组:空白对照组(未经处理的HepG2细胞),阴性对照组(只感染pLVTHm空病毒),感染pLVTHm-STAT6-RNAi组,感染pLVTHm-STAT6-ORF组.运用病毒感染HepG2细胞获得稳定表达STAT6-ORF和STAT6-RNAi的细胞株,利用PCR和Western blot的方法检测稳定细胞株中STAT6的表达丰度.CCK-8法检测稳转细胞株的细胞活性及Transwell实验检测稳转细胞迁移能力变化.结果 通过TET的筛选,成功获得了STAT6-ORF以及STAT6-RNAi的HepG2稳定表达细胞株.与对照组细胞相比,过表达STAT6-ORF转染的细胞增殖快(F=4.279,P =0.021),迁移率高;而STAT6-RNAi转染后,细胞增殖缓慢,随培养时间延长及传代(HepG2传到第三代细胞绝大部分细胞已经死亡),细胞逐渐崩解、漂浮死亡,细胞活性显著降低(F=290.114,P<0.001),迁移能力显著下降.结论 成功构建STAT6-RNAi和STAT6-ORF稳定株,为后期建立动物模型,体内验证STAT6的生物学功能奠定了物质基础.
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篇名
稳转STAT6-RNAi细胞株的构建及功能鉴定
来源期刊
中国生化药物杂志
学科
医学
关键词
慢病毒包装
STAT6 RNAi干涉
感染
HepG2细胞
年,卷(期)
2014,(6)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
51-54,58
页数
5页
分类号
R36.1
字数
4357字
语种
中文
DOI
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
张玉山
南阳市中心医院感染科
16
49
4.0
6.0
2
高国生
宁波市感染病医院肝病科
2
18
1.0
2.0
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
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研究来源
研究分支
研究去脉
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中国生化药物杂志
主办单位:
无锡锡报期刊传媒有限公司
出版周期:
月刊
ISSN:
1005-1678
CN:
32-1355/R
开本:
16开
出版地:
北京市朝阳区芍药居38号楼3层8308室
邮发代号:
28-233
创刊时间:
1976
语种:
chi
出版文献量(篇)
5513
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12
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