不同处理小鼠卵巢组织中HIFlα基因的表达分析及其真核表达载体构建

• 作者: 刘红林 吴望军 曹蕊 李伯江 杜学海 萧鹏
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小鼠 HIFlα基因 卵巢 表达分析 载体构建 卵泡发育
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 137-142
• 分类号: S814.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/j.issn.1000-2030.2014.06.020

摘要

为研究低氧诱导因子1α(HIFlα)及其下游基因胰岛素样生长因子2(IGF-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在注射孕马血清促性腺激素(PMSG)(促排组)的促排卵巢与注射生理盐水(对照组)的普通卵巢组织中的mRNA转录水平,构建小鼠HIFlα基因真核表达载体,观察其转染的小鼠颗粒细胞中HIFlα基因的表达情况,以探讨HIFlα与小鼠卵泡发育的关系.用荧光定量PCR检测不同处理组织中HIFlα、VEGF及IGF-2 mRNA转录水平,免疫组化技术定位HIFlα在卵泡中的表达,基因重组技术构建HIFl α-pcDNA3.1真核表达载体并将其转染小鼠颗粒细胞,荧光定量PCR与Western blot技术检测转染细胞中HIFlα表达情况.结果表明:HIFlα在促排小鼠卵巢中的mRNA转录水平极显著高于普通小鼠卵巢组织(P＜0.01),在促排组和对照组的其他组织内HIFlα mRNA转录水平并无显著差异;HIFl下游基因VEGF和IGF-2在促排小鼠卵巢组织中的转录水平分别显著(P＜0.05)与极显著(P＜0.01)高于普通小鼠卵巢组织中的转录水平;卵泡发育至有腔卵泡后,HIFlα才开始在卵泡中表达;HIFlα-pcDNA3.1真核表达载体能够在颗粒细胞中转录HIFlα mRNA并翻译成蛋白.结论:HIFlα只在有腔卵泡内表达,其转录水平与卵巢内有腔卵泡数量成正相关,HIFlα通过上调VEGF和IGF-2参与卵泡的发育及成熟.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘红林	南京农业大学动物科技学院	116	1257	21.0	30.0
2	吴望军	南京农业大学动物科技学院	11	58	4.0	7.0
3	李伯江	南京农业大学动物科技学院	4	68	3.0	4.0
4	杜学海	南京农业大学动物科技学院	1	4	1.0	1.0
5	曹蕊	南京农业大学动物科技学院	1	4	1.0	1.0
6	萧鹏	南京农业大学动物科技学院	1	4	1.0	1.0