单环刺螠纤溶酶Ⅲ基因克隆及原核表达

• 作者: 刘万顺 刘伟治 杜芳 杨艳 毕庆庆 韩宝芹
• 来源期刊: 中国海洋大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 单环刺螠 纤溶酶 基因克隆 表达
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 44-49
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 4996字
• 语种: 中文

摘要

单环刺蜢(Urechis unicinctus)纤溶酶(UFE)是由本实验室分离纯化得到的一组有抗凝和纤溶活性及较好生物安全性的纤溶酶.本研究为获得重组表达的UFE,根据该纤溶酶Ⅲ的(UFEⅢ)N端测序结果,设计简并引物,扩增出该蛋白的部分基因编码序列,利用5'-RACE PCR获得(UFEⅢ)的cDNA全长序列863 bp,其中开放阅读框编码261个氨基酸.通过生物信息学分析其为丝氨酸蛋白酶家族成员,并与之前实验室提取的UFEⅢ进行同源性分析,推测其为一组同工酶.以PMD18-T-UFE为模板,扩增单环刺蜢纤溶酶的成熟肽片段,构建重组表达载体pET32a-UFE和pET28a-UFE,转入Rosetta2(DE3)菌中诱导表达,UFEⅢ分别以可溶蛋白和包涵体的形式得到了表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘万顺	中国海洋大学海洋生命学院	129	1251	19.0	24.0
2	韩宝芹	中国海洋大学海洋生命学院	118	1134	18.0	24.0
3	杨艳	中国海洋大学海洋生命学院	23	186	9.0	13.0
4	杜芳	中国海洋大学海洋生命学院	1	3	1.0	1.0
5	毕庆庆	中国海洋大学海洋生命学院	4	14	3.0	3.0
6	刘伟治	中国海洋大学海洋生命学院	7	38	3.0	6.0