单环刺螠转录因子基因Sp8的克隆、原核表达和重组蛋白纯化

• 作者: 刘晓龙 史晓丽 张志峰 张立涛
• 来源期刊: 中国海洋大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 单环刺蜢 Sp8 转录因子 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 52-58
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 字数: 5340字
• 语种: 中文

摘要

转录因子Sp是一类广泛存在的锌指蛋白超家族成员,可与某些基因的上游调控序列结合,参与基因的转录调控.本研究采用同源克隆和RACE技术,获得单环刺蜢的Sp8的全长cDNA,该序列长1 913 bp,开放阅读框1 521 bp,编码506个氨基酸；将其开放阅读框cDNA克隆到原核表达载体pET28a中,并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,在37℃条件下,经1 mmol/L IPTG诱导表达4h,获得以包涵体形式存在的重组蛋白pET28a-SP,使用8mol/L尿素溶解包涵体,并通过镍离子金属螯合柱纯化获得重组蛋白,SDS-PAGE分析该蛋白的分子量约为50 kD.Sp8蛋白体外表达的成功将为研究单环刺螠相关基因的转录调控打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张志峰	中国海洋大学海洋生物遗传育种教育部重点实验室	43	342	11.0	17.0
2	刘晓龙	中国海洋大学海洋生物遗传育种教育部重点实验室	5	4	1.0	1.0
3	史晓丽	中国海洋大学海洋生物遗传育种教育部重点实验室	3	4	1.0	2.0
4	张立涛	中国海洋大学海洋生物遗传育种教育部重点实验室	2	2	1.0	1.0