棘孢曲霉β-葡萄糖苷酶的乳酸乳球菌表达

• 作者: 司丽芳 成丽丽 李娜 罗立新 黄建飞
• 来源期刊: 现代食品科技
• 关键词: 棘孢曲霉 β-葡萄糖苷酶 大肠杆菌 分泌表达 乳酸乳球菌
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 33-37,11
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

构建棘孢曲霉β-葡萄糖苷酶食品级分泌表达载体并在乳酸乳球菌MG1363(L.lactis MG1363)中实现表达.通过PCR扩增L.lactis MG1363基因组中分泌信号肽Usp45、质粒pLEB590的乳链菌肽(Nisin)抗性基因NisI和质粒pPIC9k-Abgl的棘孢曲霉β-葡萄糖苷酶基因Abgl,PCR方法连接后获得片段Usp45-Abgl-NisI,将其克隆到质粒pMD19中,CaC12法转化到E.coli DH5α,测序鉴定后将该片段连接到大肠杆菌-乳酸菌穿梭质粒pMG36e中并转化到E.coli XL1-Blue,得重组子E.coli XL1-Bhe/pMG36e-Usp45-Abgl-NisI.通过PCR方法敲除质粒pMG36e-Usp45-Abgl-NisI中红霉素抗性基因以构建食品级分泌载体pMG36N-Usp45-Abgl-NisI,将其电转到L.lactis MG1363中.转化子E.coli XL1-Blue/pMG36e-Usp45-Abgl-NisI能将β-葡萄糖苷酶分泌到胞外使七叶苷平板显色,L.lactis MG1363/pMG36N-Usp45-Abgl-NisI能在20 IU/mL Nisin上生长,经RT-PCR验证β-葡萄糖苷酶在乳酸乳球菌中实现表达.表明分泌型表达载体构建成功,为其在乳酸乳球菌中实现食品级活性表达奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗立新		75	847	17.0	25.0
2	李娜		51	219	8.0	12.0
3	黄建飞		2	17	1.0	2.0
4	成丽丽		2	7	1.0	2.0
5	司丽芳		1	0	0.0	0.0