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携带TRAIL基因的条件复制型腺病毒载体的构建及其辐射诱导表达
携带TRAIL基因的条件复制型腺病毒载体的构建及其辐射诱导表达
作者:
刘威武
刘扬
刘纯岩
吴嘉慧
孙延红
王宏芳
王志成
龚守良
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
X射线
肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体
条件复制型腺病毒
MDA-MB-2 3 1 细胞
摘要:
目的:构建携带早期生长反应基因-1(Egr-1)启动子和肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)基因的条件复制型腺病毒载体 pAd-Egr1-TRAIL-hTERT-E1A-E1Bp-E1B55K,观察其联合2.0 Gy X射线照射对人乳腺癌 MDA-MB-231细胞 TRAIL 表达的影响。方法:以 pMD18T-Egr1为模板,成功克隆Egr-1序列,将TRAIL基因置于下游,构建条件复制型腺病毒载体 pShuttle-Egr1-TRAIL-hTERT-E1 A-E1 Bp-E1B55K (CRAd.pEgr1-TRAIL),病毒包装后感染细胞,给予 X 线照射,利用 Real time PCR 法检测TRAIL mRNA 表达水平,ELISA法检测 TRAIL蛋白表达水平。实验设对照(control)组、2 Gy组、空病毒(CRAd.p)组、CRAd.p +2 Gy组、CRAd.p-Egr1-TRAIL组和CRAd.p-Egr1-TRAIL +2 Gy组。结果:成功构建 pAd-Egr1-TRAIL-hTERT-E1A-E1Bp-E1B55K,并进行了病毒包装。以病毒滴度5感染复数(MOI)感染MDA-MB-231细胞24 h后给予2.0 Gy X射线照射,4 h后MDA-MB-231各组细胞中TRAIL mRNA表达水平开始升高,8 h后各组表达达峰值;CRAd.pEgr1-TRAIL+2.0 Gy组mRNA表达水平升高最为明显,约为对照组的160倍(P<0.01),随后表达水平逐渐下降;6 h后各组 MDA-MB-231细胞中 TRAIL蛋白表达水平开始升高,24 h后各组TRAIL蛋白表达水平达峰值,48 h后TRAIL蛋白表达水平下降,但仍未降至正常水平;与其他各组比较,CRAd.pEgr1-TRAIL +2.0 Gy组TRAIL蛋白表达水平升高最明显(P<0.01)。结论:成功获得条件复制型腺病毒载体,联合2.0 Gy X射线照射可使 MDA-MB-231细胞中 TRAIL mRNA和蛋白表达水平升高。
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基因,转基因,自杀
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TRAIL
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文献信息
篇名
携带TRAIL基因的条件复制型腺病毒载体的构建及其辐射诱导表达
来源期刊
吉林大学学报(医学版)
学科
生物学
关键词
X射线
肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体
条件复制型腺病毒
MDA-MB-2 3 1 细胞
年,卷(期)
2014,(4)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
699-704
页数
6页
分类号
Q782
字数
5159字
语种
中文
DOI
10.13481/j.1671-587x.20140401
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吉林大学学报(医学版)
主办单位:
吉林大学
出版周期:
双月刊
ISSN:
1671-587X
CN:
22-1342/R
开本:
大16开
出版地:
吉林省长春市新民大街828号
邮发代号:
12-23
创刊时间:
1959
语种:
chi
出版文献量(篇)
8631
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12
总被引数(次)
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