犬瘟热病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 于作 全传松 姜骞 曲连东 李博韬 李连峰
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 犬瘟热病毒 TaqMan 实时荧光定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 589-592
• 页数: 4页
• 分类号: S852.655
• 语种: 中文

摘要

为建立快速检测犬瘟热病毒的诊断方法,根据GenBank中犬瘟热病毒核衣壳蛋白(NP)基因的保守序列设计1对特异性引物和1条特异性探针,通过对反应体系和反应条件的优化,建立了TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法.结果显示,该方法对犬瘟热病毒最低检出量为80 copies/μL,是常规RT-PCR的100倍;与其他犬类病毒不发生交叉反应;组内、组间变异系数均小于5％.对收集的67份临床样品进行检测,阳性检出率为64.2％,而常规RT-PCR的阳性检出率为44.8％.研究结果表明,建立的TaqMan实时荧光定量RT-PCR具有良好的敏感性、特异性和稳定性,为犬瘟热的早期诊断提供了技术手段.