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Ag85A-HA2原核表达载体的构建及其抗甲型流感病毒免疫效果的研究
Ag85A-HA2原核表达载体的构建及其抗甲型流感病毒免疫效果的研究
作者:
孟俊杰
戴军
李婉宜
李虹
杨靖
潘兴
裴德翠
邵京京
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
甲型流感病毒
结核杆菌分泌型抗原85A
流感病毒血凝素
原核表达融合蛋白
免疫效果
摘要:
目的 构建结核杆菌分泌型抗原85A(Ag85A)与流感病毒血凝素(HA)中HA2 (Ag85A-HA2)原核表达载体,并表达融合蛋白,研究其抗流感病毒的免疫保护效果.方法 构建Ag85A-HA2原核表达载体pET-32a(+)/Ag85A-HA2;异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达Ag85A-HA2融合蛋白,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物,并使用吸附多聚组氨酸标签(His-Tag)的蛋白纯化柱分离纯化蛋白;甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)攻击重组蛋白免疫后的BALB/c小鼠(并设PBS对照组),通过观察小鼠肺病理切片、测定肺指数及肺指数抑制率、死亡保护率等指标分析其免疫保护效果.结果 成功构建了原核表达载体pET-32a(+)/Ag85A-HA2;SDS-PAGE电泳分析显示成功表达相对分子质量为70×103的重组融合蛋白;动物实验表明,融合蛋白Ag85A-HA2对IAV攻击后的小鼠肺指数抑制率达到39.30%,死亡保护率达到80%,效果明显高于PBS对照组(P<0.05),肺部病理切片也证实融合蛋白Ag85A-HA2对小鼠肺部的保护效果显著.结论 成功构建了Ag85A-HA2原核表达载体并表达出融合蛋白,该融合蛋白在动物体内能发挥良好的抗甲型流感病毒感染的免疫保护效果.
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文献信息
篇名
Ag85A-HA2原核表达载体的构建及其抗甲型流感病毒免疫效果的研究
来源期刊
四川大学学报(医学版)
学科
关键词
甲型流感病毒
结核杆菌分泌型抗原85A
流感病毒血凝素
原核表达融合蛋白
免疫效果
年,卷(期)
2014,(4)
所属期刊栏目
论著
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结核杆菌分泌型抗原85A
流感病毒血凝素
原核表达融合蛋白
免疫效果
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
四川大学学报(医学版)
主办单位:
四川大学
出版周期:
双月刊
ISSN:
1672-173X
CN:
51-1644/R
开本:
大16开
出版地:
成都市人民南路三段17号
邮发代号:
62-72
创刊时间:
1959
语种:
chi
出版文献量(篇)
5493
总下载数(次)
8
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